| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 865-1 | ||||
Resumo:O herbicida atrazina (ATZ) é amplamente usado no controle de ervas daninhas na agricultura, especialmente nas culturas do milho e da soja. Contudo, é uma substância com alta taxa de lixiviação, contaminando o solo, água e o ar, e resultando em vários efeitos toxicológicos aos animais. Existem diversas estratégias para a biorremediação dos ambientes contaminados com ATZ, como é o caso da biodegradação, processo no qual substâncias orgânicas são decompostas e transformadas em componentes mais simples e menos prejudiciais pela ação de microrganismos ou enzimas. Assim, este estudo teve como objetivo o isolamento seletivo de fungos de sedimentos do Arroio Dourado da cidade de Foz do Iguaçu/PR, uma corrente de água que apresenta uma carga poluente de diferentes substâncias tóxicas provenientes das grandes áreas agrícolas que ficam ao seu redor e lixiviados de um antigo lixão. Para avaliação do potencial de biodegradação, os fungos isolados foram estudados quanto ao seu crescimento usando ATZ como única fonte de carbono. As amostras de sedimentos foram coletadas em triplicatas por ponto de coleta e submetidas a diluição seriada (10^(-1) a 10^(-3)), em solução salina, 100 µl de cada diluição foram plaqueados no meio MA2 enriquecido com Atrazina (2% Extrato de Malte, 1,5% Agar, 12,5ml/L de gentamicina e 10 mg/L de ATZ) e incubadas a 28°C por até 30 dias. As morfoespécies isoladas foram preservadas na Coleção de Cultivo de Microrganismos de Importância Biotecnológica-CCMIBA. O segundo procedimento consistiu no teste de enriquecimento em placa de 96 poços com 1,5 mL de meio ATZ (10 mg/L ATZ e 5g/L de Peptona) inoculados com um disco de 8 mm de diâmetro de cada fungo em triplicata e incubada a 28ºC e 130 rpm por oito dias. Após o enriquecimento, os fungos que apresentaram crescimento foram transferidos para placas de Petri contendo o meio ATZ para confirmação do crescimento. Por fim, três discos de 8 mm de cada fungos que apresentaram crescimento foram cultivados nos meios líquidos MA2 e no ATZ para comparação do crescimento e seleção. Os ensaios foram incubados a 28ºC com agitação de 130 rpm durante oito dias. Após, os ensaios foram filtrados e a biomassa seca em estufa. Os resultados foram analisados usando ANOVA. Como resultado, inicialmente, foram isolados e preservados na CCMIBA 18 fungos, destes seis foram selecionados no teste de enriquecimento. Na análise do crescimento, cinco obtiveram crescimento significativamente menor (p-valor < 0,05) no meio com ATZ em comparação com o meio MA2. Apenas o isolado CCMIBA_225 não obteve diferença estatística no crescimento com ATZ, o que o faz um candidato promissor para as análises de biodegradação. Pode-se concluir que o isolamento seletivo e enriquecimento com ATZ foram estratégias interessantes para minimizar os ensaios de seleção. Os fungos isolados serão identificados por métodos moleculares e os selecionados, especialmente o CCMIBA_225, avaliados quanto à atividade de biodegradação por métodos cromatográficos para confirmação do potencial de biorremediação. Palavras-chave: Fungos, Herbicidas, Biodegradação, Biorremediação, Isolamento seletivo Agência de fomento:Universidade Federal da Integração Latino-americana | |||||